[翻譯]臉頰採血 Submandibular Blood Collection

臉頰採血 Submandibular Blood Collection 是小鼠常被推薦的採血法。
以下黑色字體為原文內容 , 綠色為個人註記。


小鼠在下顎的背側有小血管束，那裡是眶靜脈，頜下靜脈等面部血管匯合處。藉由針刺此部位，期以最小的疼痛或痛苦來獲得血液。 ( 某些書上建議 20g以上小鼠適用)

血量最多可到 75μl
(簡單確認法: 活體單次採血之最大量(mL) 約為總血量8%或體重0.5-1%；粗估連續每日採血量為體重之0.05%。)



需要器材：
柳葉刀(lancet) 或是25G 針頭
採血管 (e.g., Microtainer® tube)
紗布

柳葉刀 Lancet
http://www.medipoint.com/html/for_use_on_mice.html
小鼠如果只需要1-2滴只要 3mm point 2 to 8 周齡 - 4mm point 
2 to 6 月齡 - 5mm point 大於6個月 - 5.5mm point 

柳葉刀有不同 size 建議選用較小的 Size，筆者曾用5mm刺23g 8周齡小鼠，快速噴出血滴約250ul血量接近重度失血手忙腳亂。改用4mm 後順利許多。

步驟

1. 用單手保定小鼠 
2. 穿刺點在下顎的後側。稍微延著下頜鉸鏈關節與耳。避開顎骨，針刺於上下頜骨交會處。 
3. 穿刺應以足夠的力量來快速插入採血刀片到刀柄。趕快拿採血管收集血液，血可能迅速流出但維持短暫的時間。 
4. 採樣後，以紗布在該處施加輕柔地壓力止血。 
5. 將動物放回籠子。 
6. 觀察動物是否流血或有任何疼痛與痛苦的症狀。

翻譯來源
Submandibular Blood Collection – Mouse SOP #PRO-008
UNIVERSITY OF DELAWARE OFFICE OF LABORATORY ANIMAL MEDICINE
https://www.udel.edu/research/pdf/Submandibular-Blood-Collection.pdf


確認針刺的位置

圖片來源
Sub-mandibular Blood Collection in Mice (preferred technique)
University of California San Francisco IACUC Guidelines and Standard Procedures
http://iacuc.ucsf.edu/Policies/SubMandibularBloodCollectionMice.doc

[翻譯]心臟採血 (實驗結束，需麻醉)

Cardiac Puncture Blood Collection (Terminal Procedure)

需要器材：

Ø   小鼠: 23-25 G針頭與 1-3 ml 針筒

Ø   大鼠: 20-25 G針頭與10-20m 針筒

Ø   麻醉器材

操作方式：

1       麻醉動物!( 必須是手術等級的深度麻醉！)

2       測試動物的角膜反射與腳趾疼痛反射。

3       血液採集可由腹側、左側或剪開動物體腔以下三種方式收集

4       腹側法（封閉法）

4.1      將動物背側躺（背斜臥）

4.2      觸診心臟

4.3      從胸骨下方朝向動物的頭，輕輕地插入針頭。

4.4      針頭和注射器應與水平保持20-30度。

4.5      插入心臟

5       左側法（封閉法）

5.1      讓動物右側躺（右側臥）

5.2      從左側胸壁觸診心臟（大約在肘部彎曲處，第5和第6肋間）

5.3      緩慢入針（垂直身體刺入肋間）進入心臟

6       打開法

6.1      將動物背斜臥

6.2      用70％的酒精將腹部皮膚濕潤

6.3      V字形切開皮膚與腹壁~距離最後一根肋骨1cm

6.4      移動內臟到旁邊

6.5      插入針頭穿過隔膜進入腔靜脈或心臟。

7       和緩地給予注射器活塞負壓。當負壓太大時，心臟可能會塌陷。

8       絕對不要將針橫向從一側移動到另一側，因為這可能會撕裂心臟或腔靜脈！

9       如果沒有看到血，慢慢地拔出針頭，讓針仍在皮膚下或隔膜然後微微地改變方向。

10     如果血液停止流動，緩慢地旋轉針頭或稍微往前或往後拉出。

11     血液收集後退出針頭。

12     執行安樂死的輔助方法(如頸椎脫離或是減開胸腔造成氣胸)，使動物確實死亡。

放血預期的血量（體重〜3％）：

Ø   25克小鼠：〜0.75毫升

Ø   300大鼠：〜9.0毫升

翻譯來源

UNIVERSITY OF DELAWARE  

OFFICE OF LABORATORY ANIMAL MEDICINE

Cardiac Puncture Blood Collection (Terminal Procedure) SOP #PRO-002

https://www.udel.edu/research/pdf/Cardiac-Puncture-Blood-Collection-Terminal.pdf