小型齧齒類動物使用二氧化碳犧牲時,
二氧化碳最佳流速應為每分鐘置換安樂死箱10 %~30 %之體積(cage volume / min)。
但是箱內最終的二氧化碳濃度到底應該是多少 ??
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煩惱許久後,到處乞討得到以下結果 (純數學):
非氣密有進氣孔與排氣孔之容器,假設進氣排氣混合均勻,不考慮比重其他因素。
假設二氧化碳氣體來源的濃度為 A 進氣t分鐘時 CO2濃度為 C(t)
安死箱體積v 乘以 CO2濃度 = 流入的CO2量 減去 排出的CO2量
得到以下公式

若 CO2 進氣濃度100% (A=1) ,選擇流速20 % Volumn/min時,
照AVMA Guideline 2013 文中說明:小鼠於106秒昏迷後,再進氣60秒 (總共166秒=2.76分鐘)
(原文中要求動物呼吸停止後再進氣1分鐘,但亦僅有提到進氣開始到動物昏迷的時間約需106秒左右。)
灌入CO2 2.76分鐘後,箱內的CO2 濃度預估將為 42.5%